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實(shí)驗(yàn)前不可忽視!確保凝膠滲透色譜儀精準(zhǔn)操作的準(zhǔn)備清單

更新時(shí)間:2026-02-02瀏覽:48次
  凝膠滲透色譜儀是一種用于測(cè)定高分子材料分子量及其分布的高效液相色譜技術(shù)。它廣泛應(yīng)用于聚合物、生物大分子(如蛋白質(zhì)、多糖)、合成樹脂、涂料、橡膠及制藥等領(lǐng)域的研發(fā)與質(zhì)量控制。其工作原理基于分子在溶液中的流體力學(xué)體積差異。色譜柱內(nèi)填充有多孔性凝膠顆粒,當(dāng)樣品溶液隨流動(dòng)相(通常為*THF、水或其他有機(jī)溶劑)流經(jīng)色譜柱時(shí),較小的分子可進(jìn)入凝膠孔隙,路徑更長(zhǎng),保留時(shí)間更久;而較大的分子被“排阻”在孔外,快速通過色譜柱。因此,不同分子量的組分按從大到小的順序依次流出,實(shí)現(xiàn)分離。
  凝膠滲透色譜儀在實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:細(xì)節(jié)決定成敗
  1、樣品處理
  溶解:根據(jù)樣品性質(zhì)選擇溶劑(如*、甲苯、DMF等),確保完q溶解。難溶樣品可采用加熱、攪拌或超聲輔助,但需避免高溫破壞樣品結(jié)構(gòu)(如蛋白質(zhì)變性)。
  過濾:使用0.2μm或0.45μm濾膜過濾樣品,去除雜質(zhì)和顆粒物,防止堵塞色譜柱。過濾時(shí)需注意濾膜材質(zhì)與溶劑兼容性(如有機(jī)相用聚四氟乙烯濾膜,水相用尼龍濾膜)。
  濃度控制:樣品濃度通常為0.1%-1%,過高會(huì)導(dǎo)致色譜峰展寬或平頭峰,過低則降低檢測(cè)靈敏度。
  2、流動(dòng)相準(zhǔn)備
  選擇:根據(jù)色譜柱類型和樣品性質(zhì)選擇流動(dòng)相,確保與檢測(cè)器兼容(如示差折光檢測(cè)器需避免使用揮發(fā)性溶劑)。
  脫氣:流動(dòng)相需脫氣處理(超聲、真空或氦氣鼓泡),防止氣泡進(jìn)入色譜柱影響分離效果。
  純度:使用HPLC級(jí)溶劑,避免雜質(zhì)干擾或額外色譜峰出現(xiàn)。
  3、儀器預(yù)熱與檢查
  預(yù)熱:開機(jī)后預(yù)熱30分鐘至1小時(shí),使儀器達(dá)到穩(wěn)定工作狀態(tài)。
  部件檢查:確認(rèn)泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器等連接正常,無泄漏或松動(dòng)。
  廢液瓶檢查:及時(shí)更換廢液瓶,防止溢出污染儀器。
 

凝膠滲透色譜儀

 

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